Clostridium difficile je anaerobní grampozitivní bacil, který je hlavní příčinou průjmu souvisejícího s antibiotiky a pseudomembranózní kolitidy ve zdravotnických zařízeních.

Specifický enterotoxin (toxin A) produkovaný bakterií C. difficile poškozuje střevní sliznici, vyvolává v ní rozvoj zánětlivého procesu a zvyšuje sekreci tekutin.

Ruská synonyma

Antigeny bakterií ve stolici, Clostridium difficile.

Anglická synonyma

Definice toxinu A Clostridium difficile.

Metoda výzkumu

Jak se správně připravit na studium?

  • Speciální školení není nutné.

Obecné informace o studiu

Clostridium difficile (C. difficile) je anaerobní, grampozitivní, sporotvorná bakterie, která způsobuje infekční průjmy a pseudomembranózní kolitidu. Nejčastěji jsou k infekci C. difficile citliví pacienti starší 65 let, kteří jsou hospitalizováni a dostávají antibakteriální léčbu (nebo po kúře antibakteriální terapie). U těchto pacientů dochází ke snížení imunity vůči C. difficile v důsledku věkové složky, přítomnosti doprovodných onemocnění a také změn střevní mikroflóry po expozici antibiotikům. Většina epidemií se vyskytuje v nemocnicích a zařízeních dlouhodobé péče. Se vznikem hypervirulentních kmenů C. difficile se staly časté případy infekce mladých pacientů s intaktní imunitou.

C. difficile kolonizuje tlusté střevo u lidí. Existují jak toxigenní, tak netoxické kmeny, ale pouze ty toxigenní způsobují onemocnění u lidí. Patogenita závisí na přítomnosti jednoho nebo dvou toxinů způsobujících průjem: toxinu A a toxinu B. Všechny toxigenní kmeny obsahují toxin B, s toxinem A nebo bez něj. Oba toxiny vedou ke smrti střevních buněk, stimulují zánětlivou reakci, která zhoršuje poškození tkání, způsobuje průjem a pseudomembranózní kolitidu. Existuje také třetí, binární toxin, který zvyšuje virulenci C. difficile.

Schopnost C. difficile způsobit střevní zánět je založena na dvou faktorech: vysoká kolonizační kapacita a imunitní odpověď pacienta. Tlusté střevo je chráněno přirozenou flórou 4000 bakteriálních druhů, které společně poskytují odolnost vůči kolonizaci patogenními druhy tím, že soutěží o základní živiny a místa připojení ke stěně střeva. Antibiotika narušují bariérovou mikroflóru a snižují ochranu před kolonizací patogenními mikroorganismy.

Klinické projevy infekce C. difficile se velmi liší, od asymptomatických nosičů až po toxické megakolon. Mezi typické známky a příznaky akutní infekce patří průjem (více než 3 řídká stolice denně), anorexie, nevolnost; v obecném krevním testu je leukocytóza. Těžký průběh je charakterizován hypoalbuminémií a vysokou leukocytózou v krvi.

ČTĚTE VÍCE
Kdy je nejlepší čas zasadit semínka rajčat?

Laboratorní a instrumentální diagnostika klostridiové infekce se provádí několika způsoby. Nejpoužívanější je enzymatická imunoanalýza, která detekuje toxin A a toxin B Clostridium difficile ve stolici. Senzitivita metody je 75-95 %, specificita 83-98 %. Mezi další metody patří polymerázová řetězová reakce pro toxigenní kmen C. difficile, studium glutamátdehydrogenázy C. difficile, kolonoskopie (zjištění obrazu pseudomembranózní kolitidy), morfologická diagnostika (histologické vyšetření střevních biopsií) a kultivace na C. obtížné.

Kdy je studium naplánováno?

  • Vývoj průjmu u pacientů, kteří dostávali antibiotika v předchozích 2 měsících, stejně jako průjem, který se vyvinul 72 hodin po hospitalizaci;
  • při podezření na pseudomembranózní kolitidu u pacientů s vysokým rizikem: věk nad 65 let, dlouhodobá hospitalizace (zejména pobyt na JIP), chirurgické výkony, přítomnost zhoubných nádorů, selhání ledvin, zánětlivá onemocnění tlustého střeva, chemoterapie, užívání protonu inhibitory pumpy, hypoalbuminémie, enterální výživa, střevní ischemie;
  • nejčastěji se kolitida spojená s C. difficile rozvíjí po užití klindamycinu nebo linkomycinu (až 6 %), semisyntetických penicilinů (5-9 %) a cefalosporinů se širokým spektrem účinku.

Co znamenají výsledky?

Komponenta Referenční hodnoty
Clostridium difficile toxin A negativně
Clostridium difficile toxin B negativně

Stejně jako u všech diagnostických postupů in vitro by výsledky testů měly být interpretovány pouze ve světle celkového klinického obrazu a dalších diagnostických metod.

Negativní výsledek testu nevylučuje infekci C. difficile, ale může být způsoben proteolytickou degradací toxinů v důsledku nesprávného skladování vzorku. Pokud je podezření na infekci, je třeba studii zopakovat – testování dalšího vzorku stolice.

Pozitivní výsledek testu nevylučuje přítomnost jiných patogenů.

Přítomnost významného množství krve ve vzorcích stolice může v některých případech vést k falešně pozitivním výsledkům.

Důležité poznámky

  • Test by se neměl používat v následujících situacích:
    • u dětí do 1 roku kvůli vysokému procentu falešně pozitivních výsledků v této věkové skupině;
    • sledovat účinnost léčby, protože u některých pacientů je toxin C. difficile detekován ve stolici ještě dlouhou dobu po klinickém uzdravení.

    Také doporučeno

    [02-056] Analýza stolice na vajíčka a larvy helmintů, prvoků a jejich cyst (Parasep)

    Literatura

    • Burke KE, Lamont JT. Infekce Clostridium difficile: celosvětové onemocnění. / Střeva Játra. 2014 led;8(1):1–6.
    • Ardeshir Rineh, Michael J Kelso, Fatma Vatansever, George P Tegos, Michael R Hamblin. Infekce Clostridium difficile: molekulární patogeneze a nová terapeutika. / Expert Rev Anti Infect Ther. leden 2014; 12(1): 131–150.
    • Ivashkin V.T., Yushchuk N.D., Maev I.V., Lapina T.L., Poluektova E.A., Shifrin O.S., Tertychny A.S., Trukhmanov A.S., Sheptulin A. O.A., Baranskaya E.K., Lyashenko O.S.V., Ivashenko O.S. Doporučení Ruské gastroenterologické asociace pro diagnostiku a léčbu onemocnění souvisejících s Clostridium difficile. / Russian Journal of Gastroenterology, Hepatology, Coloproctology. 2016;26(5):56-65.

    Stanovení toxinů Clostridium difficile, bacilu, který je hlavní příčinou průjmu souvisejícího s antibiotiky a pseudomembranózní kolitidy ve zdravotnických zařízeních.

    Informace o službě nebo studiu:

    Clostridium difficile (C. difficile) je anaerobní, grampozitivní, sporotvorná bakterie, která způsobuje infekční průjmy a pseudomembranózní kolitidu. C. difficile u lidí kolonizuje tlusté střevo. Existují jak toxigenní, tak netoxické kmeny, ale pouze ty toxigenní způsobují onemocnění u lidí. Patogenita závisí na přítomnosti jednoho nebo dvou toxinů způsobujících průjem: toxinu A a toxinu B. Všechny toxigenní kmeny obsahují toxin B, s toxinem A nebo bez něj. Oba toxiny vedou ke smrti střevních buněk, stimulují zánětlivou reakci, která zhoršuje poškození tkání, způsobuje průjem a pseudomembranózní kolitidu.

    Laboratorní a instrumentální diagnostika klostridiové infekce se provádí několika způsoby. Nejrozšířenějším enzymovým imunotestem je detekce toxinu A a toxinu B. Clostridium difficile ve výkalech.

    V jakých případech se výzkum provádí?

    • průjem, který se vyvinul při užívání antibiotik u hospitalizovaných pacientů;
    • ambulantní pacienti s příznaky průjmu 6-8 týdnů po užívání antibiotik nebo několik dní po chemoterapii;
    • screeningové studie pro stanovení předběžné diagnózy u pacientů s průjmem bez jiných infekčních nebo neinfekčních příčin;
    • přítomnost následujících příznaků: průjem, křeče, bolesti břicha, horečka, nevolnost, zvracení atd.

    Kdo si studium objedná?

    Jaký biomateriál lze použít pro výzkum?

    K čemu výzkum slouží:

    • detekce patogenní infekce Clostridium difficile.

    Podmínky a podmínky pro získání výsledků

    Doba realizace: 1 pracovní den

    Co znamená výsledek?

    Ukazatele a referenční hodnoty:

    Toxiny A/B Clostridium difficile – nezjištěno

    Negativní výsledek nevylučuje přítomnost infekce C. difficile a mohou být způsobeny proteolýzou toxinů ve vzorku, pokud jsou nesprávně skladovány. V případě důvodného podezření na infekci by mělo být provedeno dodatečné testování nového vzorku. Negativní výsledky mohou být také způsobeny přerušovaným uvolňováním toxinů nebo koncentracemi toxinů, které jsou příliš nízké na to, aby mohly být detekovány.

    Důvody pro pozitivní výsledek

    infekce nebo přenášení C. difficile. Pozitivní výsledky testů nevylučují přítomnost jiných patogenů

    Co může ovlivnit výsledek?

    porušení pravidel pro přípravu na výzkum, sběr a skladování materiálu;

    užívání antimikrobiálních léků;

    přítomnost významného množství krve ve vzorcích stolice může v některých případech vést k falešně pozitivním výsledkům.

    Jak se připravit

    Při užívání antimikrobiálních léků zaměřených na léčbu různých infekcí se nedoporučuje provádět výzkum. Aby se předešlo falešně negativním výsledkům. Je vhodné provést studii nejdříve 4 týdny po ukončení antibakteriální terapie.

    Výkaly pro výzkum se shromažďují po spontánní defekaci do jednorázové plastové nádoby s utěsněným víkem v množství 1/3 objemu nádoby. Po odběru je nutné materiál neprodleně dopravit do laboratoře. Pokud není dodání vzorku možné ihned, pak lze stolici skladovat při teplotě +2+8°C (v lednici) po dobu 10-12 hodin.

    Stále máte otázky?

    Můžete se na ně obrátit s naším odborným lékařem
    *Odpovědi na dotazy nejsou na webu zveřejněny. Zobrazí se na vašem osobním účtu