Krev je kapalná tkáň těla, která plní řadu funkcí, z nichž jednou je transport. Transportováním chemikálií v těle se biochemické procesy v různých buňkách a mezibuněčných prostorech integrují do jediného systému. Správně vybrané krevní vzorky umožňují sledovat nozologický profil hospodářských zvířat, úroveň metabolických procesů, zásobení organismu vitamíny, minerály, esenciálními aminokyselinami atd. Pro získání spolehlivých výsledků je nutné minimalizovat možnost vzniku artefaktů způsobených porušením pravidel odběru krve, její stabilizace a transportu.

Před odběrem krve z každého zvířete je třeba jehly sterilizovat varem, případně se používají sterilní. Nejlepší možností je použít zkumavky se stříkačkami nebo vakuové zkumavky. Při jejich použití nedochází ke kontaktu krve s vnějším prostředím, tzn. zůstává aseptický a nepodléhá oxidaci vzdušným kyslíkem, čímž zabraňuje agregaci krevních destiček a tvorbě sraženin ve vzorcích určených ke kompletnímu stanovení buněčného složení krve. Místo vpichu musí být ošetřeno 70% roztokem alkoholu nebo 3% roztokem kyseliny karbolové. Při odběru krve je třeba dbát na to, aby stékala po stěně do zkumavky po proudu a ne po kapkách. Krev odebraná po kapkách a napěněná je rychleji hemolyzována a často dává nesprávné výsledky v laboratorních testech.

Tabulka 1. Vliv hemolýzy na výsledky studií biochemických složek krevního séra

Existuje několik způsobů, jak odebrat vzorky krve prasatům. Mezi ně patří:

  1. Z ušní žíly a ocasní žíly

Tato metoda je vhodná, pokud potřebujete odebrat malé množství krve (2-3 ml). Pro aseptický odběr se používá injekční stříkačka s jehlou o tloušťce 0,8 mm (typ Luer) a krev se odebírá nitrožilním zavedením jehly, jinak dojde ke kontaminaci vzorku. Prasečí ušní žíly jsou obecně umístěny ve třech bodech v uchu a jsou snadno rozlišitelné. Jedna žíla se nachází podél vnějšího okraje ucha, druhá uprostřed a třetí asi 2 cm od mediálního okraje. Ocasní žíly se nacházejí ve ventrální části ocasu. Tento způsob odběru krve vyžaduje jehly 0,8×25 mm.

Po odběru krve je nutné jehlu vyjmout a místo vpichu stlačit kartáčkem, podvazem nebo palcem po dobu 2-3 minut. Nebezpečí metody spočívá v tom, že ligatura se může náhodně uvolnit a tělo zvířete krvácí.

ČTĚTE VÍCE
Kolik let žijí arabští koně?

Jedná se o bezpečnou a rychlou metodu odběru krve, která vyžaduje správné omezení zvířete. K tomu použijte kovovou smyčku nebo lano, pomocí kterého je zvíře fixováno ve stoje. Při fixaci by měla být hlava selete zvednutá tak, aby krk tvořil přímku a kůže byla napnutá.

Krev se odebírá z pravé strany (v případě respiračního selhání, které se u prasat rozvine v důsledku zápalu plic nebo pleuropneumonie, je možné, že při zavedení jehly může dojít k poškození levého bráničního nebo vagusového nervu, proto se doporučuje zavést jehla zprava). Bod vpichu se nachází na okraji brachiocefalického svalu – zevní okraj jugulární rýhy, na linii mezi okrajem ramenního kloubu a manubrem hrudní kosti (obr. 1, 2). Druhá linie probíhá od rukojeti hrudní kosti k základně ucha. Hloubka vpichu pro dospělá zvířata je od 75 do 100 mm, pro malá selata – 40-75 mm.

Rýže. 1. Povrchové svaly prasečí šíje

Rýže. 1.1. Síť žilních cév krku

Rýže. 2. Místo vpichu jugulární žíly

Rýže. 3. Odběr krve z jugulární žíly

Po zavedení jehly pod kůži je třeba píst hadičky injekční stříkačky zatáhnout zpět, aby se v ní vytvořil podtlak. Jehla se zavádí dorzomediakudálním směrem (obr. 3). Když do zkumavky začne proudit krev, je nutné zajistit, aby nepěnila, nekapala a nenarážela na dno, ale plynule stékala po stěně aby se zabránilo hemolýze červených krvinek.

Pokud jehla napoprvé nezasáhne jugulární žílu, je třeba ji vytáhnout zpět a zavést v mírně pozměněném náhodném směru. Pokud ani tentokrát není cíle dosaženo, je třeba jehlu vyměnit. Pokud po vyjmutí jehly dojde ke krvácení, je třeba místo vpichu zatlačit palcem, dokud se úplně nezastaví.

Rýže. 4. Odběr krve z lebeční duté žíly

Pro malá selata je nutná jehla 0,8×40 mm, pro dospělé prase – 1,2×100 mm. Bod vpichu se nachází v blízkosti rukojeti hrudní kosti v oblasti prvního žebra. Jehla by měla být zavedena pomalu dolů kolmo k tělu mezi první dvě žebra. Stříkačka se zavádí mírným podtlakem, jakmile se jehla dostane do duté žíly, do stříkačky bude proudit krev. Pokud po prvním zavedení krev neteče, je třeba jehlu zatáhnout a přesměrovat. Je nutné vyjmout jehlu z duté žíly nejprve vytvořením podtlaku.

ČTĚTE VÍCE
Jak skladovat houby z lesa?

Tato metoda odběru krve se používá extrémně zřídka kvůli možným komplikacím: hemotorax, srdeční tamponáda, respirační selhání, punkce krční tepny. Zpravidla až 10% odpad je pozorován u selat, jejichž krev je odebírána z lebeční duté žíly. Proto je preferovanou metodou odběr vzorků z jugulární žíly.

Technika odběru krve zahrnuje fixaci zvířete: malá selata jsou fixována v leže na břiše nebo dorzální poloze, dospělá prasata jsou fixována smyčkou na horní čelisti a přivázána k kotci. Jehla se zavede celou cestu od vnitřního koutku oka přes třetí víčko směrem k protilehlému tuberkulu ulny. Poté se jehla trochu zatáhne a krev se natáhne do injekční stříkačky nebo zkumavky. U dospělých prasat je orbitální sinus mírně posunutý inferiorně, což je třeba vzít v úvahu při zavádění jehly. Pokud po zavedení jehly nedojde do 5-7 sekund ke krvácení, je třeba ji vyměnit za novou.

V některých případech se setkáváme se zvířaty citlivými na stres, což se projevuje agresivitou, silnými obrannými akcemi a zvýšeným kvičením. V tomto případě musí být zvíře vypuštěno, poléváno studenou vodou po dobu 10 minut a izolováno, dokud se nevrátí k normálu.

Ke stabilizaci krve lze použít heparin, citrát sodný, EDTA atd. Nejlepší jsou EDTA a heparin. Nevýhodou heparinu je, že v jeho přítomnosti se bílé krvinky méně barví (pravděpodobně díky vazbě heparinu na krvinky) a agregace krevních destiček je silnější než v případě EDTA. Dále je nutné vzít v úvahu vliv antikoagulancia na biochemické (při biochemické analýze krevní plazmy) a obecné klinické krevní parametry (tab. 2).

Tabulka 2. Vliv antikoagulancií na biochemické parametry krve

Pokud je to možné, krev by měla být odebrána ráno, před krmením zvířat. Jednodenní hladovění u monogastrických zvířat zabraňuje lipémii, která může ztížit detekci plazmatických proteinů, fibrinogenu a hemoglobinu. Přibližně 25,4 % chybných výsledků v laboratorní diagnostice je spojeno s nedodržením pravidel odběru vzorků, 46 % je způsobeno skladováním a přepravou a 28,6 % je způsobeno chybami v laboratoři.

Pro získání nejspolehlivějších výsledků musí být vzorky krve odeslány do laboratoře čerstvé (nerozdělená krev se skladuje nejdéle 2 hodiny). Pokud není možné tento požadavek splnit, je nutné co nejdříve (do 1-2 hodin) oddělit sérum od vytvořených prvků, protože většina enzymů (alaninaminotransferáza, aspartátaminotransferáza, laktátdehydrogenáza, alkalická fosfatáza) stejně jako draslík, fosfor, měď, jsou ve vysokých koncentracích obsaženy ve formovaných prvcích a difundují do séra. Proto skladování neseparovaného séra a hemolýza vedou k uvolňování těchto enzymů do séra z krvinek a k nadhodnocení některých biochemických parametrů. V tomto případě glukóza naopak klesá asi o 10% za hodinu v důsledku glykolytických procesů probíhajících v erytrocytech a také klesá koncentrace chloridů, které se hromadí v erytrocytech.

ČTĚTE VÍCE
Jak se nazývá půda z hlíny a písku?

Separované sérum je nutné dopravit do laboratoře za předpokladu, že bude vyšetřeno následující den, v termoboxu při teplotě 4-8 o C, s vyloučením působení světla a tepla. Pokud má být sérum vyšetřeno později, do týdne nebo následujícího týdne, musí být zmraženo na -20°C a vyšetřeno ihned po rozmrazení.

Pokud je tedy účelem odběru krve získat spolehlivé výsledky, je nutné při odběru, skladování a přepravě vzorků důsledně dodržovat metodické požadavky. V moderních podmínkách (nasycenost veterinárního programu, odlehlost laboratoře od výroby, nedostatek potřebného inventáře a vybavení) je to téměř nemožné. Při interpretaci laboratorních výsledků je proto nutné vzít v úvahu všechny faktory, které je mohou ovlivnit. Neexistuje žádná jasná hranice odlišující patologii od fyziologické normy u prasat. Na výsledky získané z laboratoře se můžete spolehnout, ale nemůžete jim 100% věřit.

Literární prameny

  1. Veterinární klinická patologie / Jackson M. – 384 s.
  2. Meyer, D. Veterinární laboratorní medicína. Interpretace a diagnostika /D. Meyer, J. Harvey // Překlad z angličtiny. – M.: Sofion, 2007. – 456 s.
  3. Schweinekrankheiten / K. Heinritzi, H. R. Gindele, G. Reiner, U. Schnurrbusch / Verlag eugen ulmer Stuttgart. – 2006. – 480 s.
  4. Průvodce výživou prasat: 2. / YF Patience et all. – 2001. – 271 s.